Évaluation du métabolisme du NAD+ dans les cultures de cellules humaines, les érythrocytes, le liquide céphalo-rachidien et le muscle squelettique des primates

Demarest, T.G.; Truong, G.T.D.; Lovett, J.; et al.

Compte tenu de l’importance du métabolome NAD⁺ dans le vieillissement et la santé cellulaire, Demarest et coll. ont mis au point une nouvelle méthode de spectrométrie de masse par dilution isotopique (utilisant HILIC-MRM/MS) pour leur quantification dans une gamme d’échantillons biologiques (allant des cellules cultivées aux tissus cliniques). La méthode optimisée est à la fois rapide (séries de 14 minutes) et sensible (par exemple, NAD⁺ et NMN quantifiés pour la première fois dans le LCR), tout en utilisant un extrait de levure U-¹³C (ISO1) pour la quantification absolue. Un large éventail de cofacteurs (p. ex., NAD⁺, NADH, RMN) et AcCoA sont quantifiés avec succès à l’aide de courbes standard. Cette méthode devrait s’avérer utile pour mieux comprendre les altérations métaboliques résultant de processus et de troubles normaux.