Flux métabolique

Les traceurs isotopiques sont des outils essentiels pour surveiller l'activité des voies métaboliques, c'est-à-dire le flux. Pour quantifier le flux du métabolisme central du carbone dans les cellules de mammifères en culture, le D-glucose (¹³C₆, 99 %) (CLM-1396) ou la L-glutamine ( ¹³C₅, 99 %) (CLM-1822) est ajouté aux milieux dépourvus de ces principaux nutriments. Les cellules sont cultivées dans le milieu marqué et. le marquage des métabolites est mesuré par GC-MS ou LC-MS. Le glucose est traditionnellement considéré comme la principale source de carbone pour de nombreux types de cellules, en particulier les cellules cancéreuses. Des études récentes montrent cependant que la glutamine joue souvent un rôle prédominant dans l’alimentation du cycle de l’acide tricarboxylique (TCA). L'étendue de la contribution de la glutamine aux unités à quatre carbones du cycle TCA peut être mesurée sur la base du marquage au malate et à l'asparate, et aux unités à deux carbones sur la base du marquage de l'acétyl-CoA et des acides gras. Le citrate est une molécule particulièrement informative, car elle reflète à la fois les unités à deux et quatre carbones du cycle du TCA. Grâce à des instruments modernes, il est possible de mesurer en parallèle le marquage isotopique de toutes ces espèces, et de dizaines d’autres, permettant ainsi une quantification des flux au niveau des systèmes. Ces méthodes peuvent également s'appliquer au contexte in vivo, avec des souris ou des patients perfusés avec des nutriments marqués avant la résection d'une tumeur ou d'un autre échantillon de tissu. L'importance du métabolisme dans la bio-ingénierie et la physiopathologie des maladies conduit à une large application de ces méthodes dans les sciences biochimiques.

Cellular Metabolism and Metabolomics

➤ Stable Isotope Standards for Mass Spectrometry
➤ Stable Isotope-Labeled Products for Metabolic Research
➤ Cancer Metabolism and Related Research
➤ Amino Acid Indicators and Protein Turnover
➤ Research Use of CIL Products  
➤ Product Quality Designations  
➤ Enhanced Data Package (EDP)

Application Note
➤ Analysis of Whole-Body Branched-Chain Amino Acid Metabolism in Mice Utilizing 20% Leucine ¹³C₆ and 20% Valine ¹³C₆ Mouse Feed

Researcher Perspective
➤ Stable Isotopes in Metabolomics and Metabolism

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Questions fréquemment posées

Qu'est-ce que ¹³C-MFA ? ¹³C-MFA ou ¹³C L'analyse des flux métaboliques est une technique assistée par des isotopes stables qui constitue la référence en matière de détermination exacte et précise des flux. Le flux peut être déduit à l'aide de traceurs marqués par des isotopes stables en combinaison avec la spectrométrie de masse (MS) ou la résonance magnétique nucléaire (RMN).

CIL propose-t-il différentes qualités de produits pour l'analyse des flux métaboliques ? Oui, CIL propose des tests supplémentaires sur bon nombre de nos produits en tant que service à nos clients. Veuillez consulter le tableau Désignation de qualité du produit pour une description des différentes qualités.

Quand les produits -MPT de CIL sont-ils testés pour leur contenu microbiologique ? Ils sont testés en vrac au moment de leur sortie. Les aliquotes ultérieures ne sont pas retestées et garanties à réception de la commande. Les tests microbiologiques n'impliquent pas l'adéquation à l'utilisation prévue.

CIL propose-t-il des produits pour les essais cliniques ? Oui, CIL peut produire du cGMP -matériau de qualité adapté aux essais cliniques. N'hésitez pas à nous contacter pour discuter de votre projet.

Antoniewicz, M.R. 2021. A guide to metabolic flux analysis in metabolic engineering: Methods, tools and applications. Metab Eng, 63, 2-12. Read more.