Evaluación del metabolismo de NAD+ en cultivos celulares humanos, eritrocitos, líquido cefalorraquídeo y músculo esquelético de primates

Demarest, T.G.; Truong, G.T.D.; Lovett, J.; et al.

Dada la importancia del metaboloma NAD⁺ en el envejecimiento y la salud celular, Demarest et al. desarrollaron un nuevo método de espectrometría de masas de dilución de isótopos (utilizando HILIC-MRM/MS) para su cuantificación en una gama de muestras biológicas (que van desde células cultivadas hasta tejidos clínicos). El método optimizado es rápido (14 minutos de ejecución) y sensible (por ejemplo, NAD ⁺ y NMN cuantificados por primera vez en LCR), mientras que utiliza un extracto de levadura U-¹³C (ISO1) para la cuantificación absoluta. Una amplia gama de cofactores (por ejemplo, NAD ⁺, NADH, RMN) y AcCoA se cuantifican con éxito a través de curvas estándar. Este método debería resultar útil para comprender mejor las alteraciones metabólicas derivadas de procesos y trastornos normales.