Beurteilung des NAD+-Metabolismus in menschlichen Zellkulturen, Erythrozyten, Zerebrospinalflüssigkeit und Primatenskelettmuskel

Demarest, T.G.; Truong, G.T.D.; Lovett, J.; et al.

Angesichts der Bedeutung des NAD⁺-Metaboloms für das Altern und die Zellgesundheit entwickelten Demarest et al. eine neuartige Isotopenverdünnungs-Massenspektrometrie-Methode (unter Verwendung von HILIC-MRM/MS) für ihre Quantifizierung in einer Reihe von Bioproben (von kultivierten Zellen bis hin zu klinischem Gewebe). Die optimierte Methode ist sowohl schnell (14 min Durchläufe) als auch empfindlich (z. B. NAD⁺ und NMN zum ersten Mal in CSF quantifiziert), während ein U-¹³C Hefeextrakt (ISO1) zur absoluten Quantifizierung verwendet wird. Eine Vielzahl von Cofaktoren (z.B. NAD⁺, NADH, NMR) und AcCoA werden erfolgreich über Standardkurven quantifiziert. Diese Methode sollte sich als nützlich erweisen, um die metabolischen Veränderungen, die sich aus normalen Prozessen und Störungen ergeben, besser zu verstehen.