La chromatographie d’affinité des métaux immobilisés couplée à la surveillance des réactions multiples permet une quantification reproductible du phosphosignalage

Kennedy, J.J.; Yan, P.; Zhao, L.; et al.

Avec la nécessité de tests quantitatifs très robustes pour la signalisation phospho, Paulovich, A. et al. ont développé une méthode IMAC-MRM multiplex sans anticorps avec des étalons peptidiques marqués isotopiquement pour quantifier 107 phosphosites (93 protéines) dans les lysats de cellules humaines. Ces phosphopeptides sont impliqués dans les voies de signalisation de la réponse aux dommages à l’ADN (DDR) et ont été quantifiés avec une excellente linéarité (≥3 ordres de grandeur) et un haut degré de précision (CV intra et inter-essais de <13%). Des possibilités d’évaluer et d’élargir ce panel de phosphopeptides sont disponibles pour la quantification de la signalisation cellulaire grâce à l’accès aux ressources en ligne fournies avec cet article.