La cromatografía de afinidad metálica inmovilizada acoplada a la monitorización de reacciones múltiples permite la cuantificación reproducible de la fosfoesignación

Kennedy, J.J.; Yan, P.; Zhao, L.; et al.

Con la necesidad de ensayos cuantitativos altamente robustos para la fosfo-señalización en mente, Paulovich, A. et al. desarrollaron un método IMAC-MRM multiplex libre de anticuerpos con estándares de péptidos marcados isotópicamente para cuantificar 107 fosfositios (93 proteínas) en lisados de células humanas. Estos fosfopéptidos están implicados en las vías de señalización de respuesta al daño (DDR) del ADN y se cuantificaron con una excelente linealidad (≥3 órdenes de magnitud) y un alto grado de precisión (<13% CV intra e interensayo). Las oportunidades para evaluar y expandir este panel de fosfopéptidos están disponibles para la cuantificación de la señalización celular a través del acceso a los recursos en línea proporcionados con este artículo.