Flujo metabólico

Los trazadores de isótopos son herramientas esenciales para monitorear la actividad de las vías metabólicas, es decir, el flujo. Para cuantificar el flujo en el metabolismo central del carbono en células de mamíferos cultivadas, se utiliza D-glucosa (¹³C₆, 99%) (CLM-1396) o L-glutamina (¹³C₅, 99 %) (CLM-1822) se añade a medios que carecen de estos nutrientes principales. Las células se cultivan en los medios marcados y. El etiquetado de metabolitos se mide mediante GC-MS o LC-MS. Tradicionalmente se ha considerado que la glucosa es la principal fuente de carbono para muchos tipos de células, especialmente las cancerosas. Sin embargo, estudios recientes muestran que la glutamina suele desempeñar un papel predominante en la alimentación del ciclo del ácido tricarboxílico (TCA). El grado de contribución de la glutamina a las unidades de cuatro carbonos del ciclo del TCA se puede medir basándose en el marcaje de malato y asparato, y a las unidades de dos carbonos basándose en el marcaje de acetil-CoA y ácidos grasos. El citrato es una molécula particularmente informativa porque refleja unidades de dos y cuatro carbonos del ciclo del TCA. Con instrumentación moderna, es posible medir en paralelo el etiquetado de isótopos de todas estas especies y de docenas más, lo que permite la cuantificación del flujo a nivel de sistemas. Estos métodos pueden trasladarse también al entorno in vivo, con ratones o pacientes infundidos con nutrientes marcados antes de la resección de un tumor u otra muestra de tejido. La importancia del metabolismo tanto en la bioingeniería como en la fisiopatología de las enfermedades está llevando a una amplia aplicación de estos métodos en las ciencias bioquímicas.

Cellular Metabolism and Metabolomics

➤ Stable Isotope Standards for Mass Spectrometry
➤ Stable Isotope-Labeled Products for Metabolic Research
➤ Cancer Metabolism and Related Research
➤ Amino Acid Indicators and Protein Turnover
➤ Research Use of CIL Products  
➤ Product Quality Designations  
➤ Enhanced Data Package (EDP)

Application Note
➤ Analysis of Whole-Body Branched-Chain Amino Acid Metabolism in Mice Utilizing 20% Leucine ¹³C₆ and 20% Valine ¹³C₆ Mouse Feed

Researcher Perspective
➤ Stable Isotopes in Metabolomics and Metabolism

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Preguntas frecuentes

¿Qué es ¹³C-MFA? ¹³C-MFA o ¹³C El análisis del flujo metabólico es una técnica asistida por isótopos estables que es el estándar de oro para la determinación del flujo exacta y precisa. El flujo se puede inferir utilizando trazadores marcados con isótopos estables en combinación con espectrometría de masas (MS) o resonancia magnética nuclear (NMR).

¿Ofrece CIL ¿Diferentes grados de productos para el análisis del flujo metabólico? Sí, CIL proporciona pruebas adicionales en muchos de nuestros productos como servicio a nuestros clientes. Consulte el cuadro Designación de calidad del producto para obtener una descripción de los diferentes grados.

¿Cuándo se prueba el contenido microbiológico de los productos -MPT de CIL? Se prueban a granel en el momento del lanzamiento. Las alícuotas posteriores no se vuelven a analizar ni se garantizan al recibir el pedido. Las pruebas microbiológicas no implican idoneidad para ningún uso previsto.

¿Ofrece CIL productos para ensayos clínicos? Sí, CIL puede producir cGMP -Material de calidad adecuado para ensayos clínicos. Por favor contáctenos para discutir su proyecto.

Antoniewicz, M.R. 2021. A guide to metabolic flux analysis in metabolic engineering: Methods, tools and applications. Metab Eng, 63, 2-12. Read more.