Stoffwechselfluss

Isotopentracer sind wesentliche Werkzeuge zur Überwachung der Stoffwechselaktivität, d. h. des Flusses. Zur Quantifizierung des Flusses im zentralen Kohlenstoffstoffwechsel in kultivierten Säugetierzellen wurden D-Glucose (¹³C₆, 99 %) (CLM-1396) oder L-Glutamin ( ¹³C₅, 99 %) (CLM-1822) wird Medien zugesetzt, denen diese Hauptnährstoffe fehlen. Zellen werden in den markierten Medien gezüchtet und. Die Metabolitenmarkierung wird mittels GC-MS oder LC-MS gemessen. Glukose gilt traditionell als primäre Kohlenstoffquelle für viele Zelltypen, insbesondere für Krebszellen. Neuere Studien zeigen jedoch, dass Glutamin häufig eine vorherrschende Rolle bei der Versorgung des Tricarbonsäurezyklus (TCA) spielt. Das Ausmaß des Beitrags von Glutamin zu den Vier-Kohlenstoff-Einheiten des TCA-Zyklus kann anhand der Malat- und Asparat-Markierung und zu den Zwei-Kohlenstoff-Einheiten anhand der Acetyl-CoA- und Fettsäure-Markierung gemessen werden. Citrat ist ein besonders informatives Molekül, da es sowohl Zwei- als auch Vier-Kohlenstoff-Einheiten des TCA-Zyklus widerspiegelt. Mit moderner Instrumentierung ist es möglich, die Isotopenmarkierung aller dieser und Dutzender weiterer Arten parallel zu messen und so eine Flussquantifizierung auf Systemebene zu ermöglichen. Diese Methoden können auch auf die in vivo-Einstellung übertragen werden, wobei Mäusen oder Patienten vor der Resektion eines Tumors oder einer anderen Gewebeprobe markierte Nährstoffe infundiert werden. Die Bedeutung des Stoffwechsels sowohl in der Biotechnik als auch in der Pathophysiologie von Krankheiten führt zu einer breiten Anwendung dieser Methoden in den biochemischen Wissenschaften.

Cellular Metabolism and Metabolomics

➤ Stable Isotope Standards for Mass Spectrometry
➤ Stable Isotope-Labeled Products for Metabolic Research
➤ Cancer Metabolism and Related Research
➤ Amino Acid Indicators and Protein Turnover
➤ Research Use of CIL Products  
➤ Product Quality Designations  
➤ Enhanced Data Package (EDP)

Application Note
➤ Analysis of Whole-Body Branched-Chain Amino Acid Metabolism in Mice Utilizing 20% Leucine ¹³C₆ and 20% Valine ¹³C₆ Mouse Feed

Researcher Perspective
➤ Stable Isotopes in Metabolomics and Metabolism

Verwandte Produkte

Häufig gestellte Fragen

Was ist ¹³C-MFA? ¹³C-MFA oder ¹³C Die metabolische Flussanalyse ist eine durch stabile Isotope unterstützte Technik, die den Goldstandard für eine genaue und präzise Flussbestimmung darstellt. Der Fluss kann mithilfe stabil isotopenmarkierter Tracer in Kombination mit Massenspektrometrie (MS) oder Kernspinresonanz (NMR) abgeleitet werden.

Wird von CIL angeboten Verschiedene Produktqualitäten für die Stoffwechselflussanalyse? Ja, CIL bietet unseren Kunden zusätzliche Tests für viele unserer Produkte als Service an. Eine Beschreibung der verschiedenen Qualitäten finden Sie in der Tabelle Produktqualitätsbezeichnung.

Wann werden die -MPT-Produkte von CIL auf ihren mikrobiologischen Gehalt getestet? Sie werden bei der Freigabe in großen Mengen getestet. Nachfolgende Aliquots werden nicht erneut getestet und sind nach Eingang der Bestellung garantiert. Mikrobiologische Tests bedeuten nicht, dass sie für einen bestimmten Verwendungszweck geeignet sind.

Bietet CIL Produkte für klinische Studien an? Ja, CIL kann cGMP produzieren Hochwertiges Material, das für klinische Studien geeignet ist. Bitte kontaktieren Sie uns, um Ihr Projekt zu besprechen.

Antoniewicz, M.R. 2021. A guide to metabolic flux analysis in metabolic engineering: Methods, tools and applications. Metab Eng, 63, 2-12. Read more.