Membranproteine

Membranproteine machen zwischen 20% und 30% aller exprimierten Proteine aus. Sie sind im Bereich der Strukturbiologie und der pharmazeutischen Wirkstoffentwicklung von großem Interesse, da sie mehr als die Hälfte aller heutigen Wirkstoffziele ausmachen. Membranproteine haben ein hydrophobes Äußeres, sind relativ dynamisch und werden in relativ geringen Mengen produziert. Obwohl diese Faktoren Schwierigkeiten bei der Beschaffung stabiler Präparate für NMR-Analysen verursachen, können Phospholipide und Detergenzien verwendet werden, um eine ordnungsgemäße Solubilisierung und Stabilität bei der Untersuchung von Membranproteinen zu gewährleisten. Trotz der hohen funktionellen Bedeutung von Membranproteinen ist die Strukturbestimmung für diese viel schwieriger als für globuläre Proteine. Glücklicherweise gibt es viele Probenvorbereitungsbedingungen, die sowohl für die Lösungs- als auch für die Festkörper-NMR gewählt werden können.

Cambridge Isotope Laboratories, Inc. bietet deuterierte Phospholipide und Detergenzien von FB Reagents für die NMR-basierte wissenschaftliche Erforschung von Membranproteinen an.

Stable Isotopes for Biomolecular NMR

➤ Deuterated Phospholipids and Detergents from FB Reagents

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Häufig gestellte Fragen

Was sind die Vorteile der Verwendung von deuterierten Phospholipiden? Die Verwendung von deuterierten Detergenzien und Phospholipiden ermöglicht eine Vereinfachung des 1-H-NMR-Spektrums sowie eine einfachere Detektion von Signalen von Biomolekülen in mehrdimensionalen NMR-Experimente. Darüber hinaus ermöglichen sie die Minimierung von dipolaren Relaxationseffekten, was wiederum zu einer Signalverstärkung in bestimmten Systemen führt.

Movelan, K.T.; Wegstroth, M.; Overkamp, K.; et al. 2020. Imidazole-imidazole hydrogen bonding in the pH-densing histidine side chains of influenza A M2. J Am Chem Soc, 142(6), 2704-2708. PMID: 31970979 
Bibow, S. 2019. Opportunities and challenges of backbone, sidechain and RDC experiments to study membrane protein dynamics in a detergent-free lipid environment using solution state NMR. Front Mol Biosci, 6, 103. PMID: 31709261
Eddy, M.T.; Yu, T.Y.; Wagner, G.; et al. 2019. Structural characterization of the human membrane protein VDAC2 in lipid bilayers by MAS NMR. J Biomol NMR, 73(8-9), 451-460. PMID: 31407201
Bayrhuber, M.; Maslennikov, I.; Kwiatkowski, W.; et al.  2019. NMR solution structure and functional behavior of the human proton channel. Biochemistry, 58(39), 4017-4027. PMID: 31365236
Toyama, Y.; Shimada, I. 2019. Frequency selective coherence transfer NMR spectroscopy to study the structural dynamics of high molecular weight proteins. J Mag Res, 304, 62-67. PMID: 31129430
Brazin, K.N.; Mallis, R.J.; Boeszoermenyi, A.; et al. 2018. The T cell antigen receptor a transmembrane domain coordinates triggering through regulation of bilayer immersion and CD3 subunit associations. Immunity, 49(5), 829-841. PMID: 30389415
O'Brien, E.S.; Lin, D.W.; Fuglestad, B.; et al. 2018. Improving yields of deuterated, methyl labeled protein by growing in H₂O. J Biomol NMR, 71(4), 263-273 . PMID: 30073492
Hagn, F.; Nasr, M.L.; Wagner, G. 2018. Assembly of phospholipid nanodiscs of controlled size for structural studies of membrane proteins by NMR. Nat Protoc, 13(1), 79-98. PMID: 29215632
Arenas, R.C.; Danielczak, B.; Martel, A.; et al. 2017. Fast collisional lipid transfer among polymer-bounded nanodiscs. Scientific Reports, 7, 45875. PMID: 28378790
Bibow, S.; Polyhach, Y.; Eichmann, C.; et al. 2017. Solution structure of discoidal high-density lipoprotein particles with a shortened apolipoprotein A-I. Nat Struct Mol Biol, 24(24), 187-193. PMID: 28024148
Laguerre, A.; Lõhr, F.; Henrich, E.; et al. 2016. From nanodiscs to isotropic bicelles: a procedure for solution NMR studies of detergent sensitive integral membrane proteins. Structure, 24(10), 1830-1841. PMID: 27618661
Bugge, K.; Papaleo, E.; Haxholm, G.W.; et al. 2016. A combined computational and structural model of the full-length human prolactin receptor. Nat Commun, 7, 11578. PMID: 27174498
Hagn, F.; Etzkorn, M.; Raschle, T.; et al. 2013. Optimized phospholipid bilayer nanodiscs facilitate high-resolution structure determination of membrane proteins. J Am Chem Soc, 135(5), 1919-1925. PMID: 23294159