Espectrometría de masas clínica

La medicina de laboratorio clínico ha evolucionado y se ha diversificado en las últimas décadas. Aunque el campo ha visto grandes avances (en términos de metodología, instrumentación, informática y automatización) y transiciones (lejos de los inmunoensayos convencionales), La espectrometría de masas (MS) ahora se utiliza en varias áreas de diagnóstico. Esto abarca el monitoreo terapéutico de medicamentos, toxicología y pruebas de endocrinología, entre otras áreas de detección. 

La espectrometría de masas (MS) es una técnica fundamental y versátil para tales mediciones de analitos debido a su sensibilidad, especificidad, rendimiento y multiplexicidad. Los estándares marcados con isótopos estables son parte integral de este análisis, como se señala en las referencias. abajo. Otro ejemplo de espectrometría clínica de masas es el trabajo descrito en la Perspectiva del investigador de Joel Braunstein, MD, y Tim West, PhD (C2N Diagnostics). Proporcionan una visión general del ensayo cinético de marcado de isótopos estables (SILK)™ desarrollado para medir biomarcadores de proteínas derivadas de la sangre, como las isoformas α-β, involucradas en el estudio de la enfermedad de Alzheimer y para rastrear su progresión.

Cambridge Isotope Laboratories, Inc. se enorgullece de ofrecer una variedad de estándares analíticos para la identificación/cuantificación en muestras clínicas de EM. Estos estándares están altamente caracterizados para fines analíticos, adecuados para su uso en una variedad de muestras. tipos, y disponible en varios tamaños y formatos de embalaje.

Stable Isotope-Labeled Products for Metabolic Research

❛❛Quantitative analysis in clinical diagnostics using mass spectrometry remains a difficult endeavor particularly for small molecules due to chemical similarity and isobaric forms of many substances. Both chromatography and the use of isotopically labeled internal standards to perform small-molecule quantification are required to obtain good quantitative results in many applications. The use of isotopically labeled internal standards remains the best solution as these standards ideally match the chemical behavior of their analytes, thus leading to better quantification than obtained when using structure homologues with physicochemical characteristics.❜❜

– David C. Kasper, PhD | CEO, ARCHIMED Life Science

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Preguntas frecuentes

Cuáles son los criterios clave para seleccionar estándares marcados con isótopos estables para mediciones clínicas? Estos compuestos exógenos deben ser estructuralmente únicos (dentro de un tipo de muestra dado) y similares (al objetivo nativo, desde un punto de vista fisicoquímico), así como resolubles por MS (generalmente se prefieren ≥3 Da), libres de intercambio H/D (si se emplean estándares D) e idealmente coeluidos (con su objetivo nativo).

Cómo y cuándo se deben agregar los estándares internos en el flujo de trabajo? Lo ideal es añadir el IS en el primer paso después de mezclar/pipetear la muestra. Esto debe ser bioquímicamente idéntico al analito objetivo y agregarse con precisión a las muestras (así como a los calibradores y QC) para garantizar la recuperación / corrección de la varianza de la muestra.

Cuál es una referencia útil para realizar ensayos metabolómicos en la clínica, así como para medir y reportar estos datos? El documento recientemente publicado "Bioanalytical Method Validation: Guidance for Industry" (US FDA, mayo de 2018) describe las últimas recomendaciones y criterios de aceptación para el desarrollo, validación y aplicación de métodos, así como la documentación y los informes. Los métodos bioanalíticos a los que pertenecen son estudios clínicos humanos, que pueden utilizarse para determinar cuantitativamente los niveles de metabolitos en muestras biológicas para el análisis de biomarcadores, por ejemplo.

Cuál es la tolerancia para los tamaños envasados de 0,1 mg de CIL? La tolerancia es del ±10% para estos artículos en particular.

Ejemplos de referencias

Yin, Y.; Yu, S.; Qiu, L.; et al. 2019. Establishment of a rapid and simple liquid chromatography tandem mass spectrometry method for measuring aldosterone in urine. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci, 1113, 84-90. PMID: 30901733
Comhair, S.A.A.; Bochenek, G.; Baicker-McKee, S.; et al. 2018. The utility of biomarkers in diagnosis of aspirin exacerbated respiratory disease. Respir Res, 19(1), 210-216. PMID: 30376852
Mertens, B.; Orti, V.; Vialaret, J.; et al. 2018. Assessing a multiplex-targeted proteomics approach for the clinical diagnosis of periodontitis using saliva samples. Bioanalysis, 10(1), 35-45. PMID: 29243487
Lindahl, A.; Heuchel, R.; Forshed, J.; et al. 2017. Discrimination of pancreatic cancer and pancreatitis by LC-MS metabolomicsMetabolomics, 13(5), 61. PMID 28413374   
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Gervasoni, J.; Schiattarella, A.; Primiano, A.; et al. 2016. Simultaneous quantification of 17-hydroxyprogesterone, androstenedione, testosterone and cortisol in human serum by LC-MS/MS using TurboFlow online sample extraction. Clin Biochem, 49(13-14), 998-1003. PMID: 27208555   
Yang, Y.; Rogers, K.; Wardle, R.; et al. 2016. High-throughput measurement of 25-hydroxyvitamin D by LC-MS/MS with separation of the C3-epimer interference for pediatric populations. Clin Chim Acta, 15(454), 102-106. PMID: 26772722   
Peitzsch, M.; Dekkers, T.; Haase, M.; et al. 2015. An LC-MS/MS method for steroid profiling during adrenal venous sampling for investigation of primary aldosteronism. J Steroid Biochem Mol Biol, 145, 75-84. PMID: 25312486